| Sumario: |
Clostridioides difficile es una bacteria enteropatógena responsable de brotes graves de
infecciones intrahospitalarias y casos de diarreas esporádicas a nivel mundial. Causa un
cuadro conocido como diarrea asociada a C. difficile (DACD), la cual puede evolucionar a
colitis pseudomembranosa, megacolon tóxico e inclusive hasta la muerte. La patogénesis de
la infección por C. difficile primordialmente depende de sus principales factores de
virulencia, la toxina A (TcdA) y la toxina B (TcdB) capaces de ocasionar una potente
alteración del tejido intestinal, disrupción epitelial, retención de líquidos, inducción de una
intensa respuesta inflamatoria y exacerbada infiltración de PMNs. Esta última característica
clínica es determinante en la severidad de la enfermedad, sobre todo, cuando hay estímulos
inflamatorios continuos provocando una inflamación de tipo crónico desencadenando una
desregulación neutrofílica.
A pesar de que se sabe que los neutrófilos (PMNs) juegan un papel importante en la
patología de esta infección, no existen estudios in vivo que utilicen estrategias de agotamiento
de PMNs expuestos a las toxinas de C. difficile en el lumen intestinal evaluando directamente
el papel de estas células inmunes en la patología desencadena por las toxinas de C. difficile.
Por esa razón, esta investigación evaluó el efecto en la respuesta inflamatoria, actividad
mieloperoxidasa (MPO) y efectos histopatológicos inducidos por las toxinas de C. difficile
en presencia o ausencia de PMNs. Para esto se utilizó un biomodelo reduccionista de asa
intestinal ligada combinado con un modelo de ratones neutropénicos y no neutropénicos a
los cuales se les inocularon las toxinas purificadas combinadas
TcdAVPI10463/003+TcdBNAP1/027, y por separado TcdAVPI10463/003, TcdBNAP1/027 y TcdBNAP1/019
de C. difficile. Adicionalmente, se evaluó la capacidad de los PMNs humanos y murinos de
fagocitar y asociarse a los clostridios diseñando un modelo in vitro.
La capacidad fagocítica de los PMNs de ratón fue más eficiente que la de los PMN de
humanos. En los ratones, la disminución de la cantidad de plaquetas en sangre favoreció aún
más el proceso de asociación (fagocitosis) de los PMNs frente a los clostridios. En el modelo
in vivo, se observó que la depleción parcial de los PMNs, tanto periférica como tisularmente,
generó una disminución en el nivel de patogénesis producida por las toxinas de C. difficile,
ocasionando una reducción significativa de la respuesta proinflamatoria, inflamatoria,
indicadores de daño histopatológico y actividad MPO. La reducción de estos efectos fue
observada mayormente con la enterotoxina TcdA. En contraste, también se logró identificar
que la exotoxina TcdBvNAP1 posee una actividad histopatológica casi similar a la TcdBNAP1.
Estos resultados sugieren que, durante el proceso de inflamación los PMNs promueven
parte del proceso patológico, debido a la desregulación que se observa durante la patogénesis
producida por las toxinas TcdA y TcdB en la infección causada por C. difficile. Este estudio
permitió mejorar el conocimiento sobre el papel de los PMNs frente a las toxinas TcdA y TcdB en un ambiente fisio-patológico real con la interacción de las múltiples señales tisulares
generadas por estas toxinas.
|