Determinaci?n de la efectividad de cinco protocolos de extracci?n de ADN a partir de material parafinado para estudios moleculares

El estudio evalu? cuatro distintos protocolos de uso com?n en laboratorio y uno comercial, para la extracci?n de ADN a partir de material fijado en formalina y parafinado, correspondiente a cervix uterinos producto de conizaciones y LEEPs (loop electrocautery excision procedure), provenientes de los...

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Main Authors: Jim?nez Arce, Gerardo, Villalobos Quesada, Mar?a Jos?, Jim?nez Montero, Ernesto, Palma Platero, Walter
Format: Artículo
Language: Español
Published: 2015
Subjects:
PCR
ADN
DNA
Online Access: http://revistas.ucr.ac.cr/index.php/medica/article/view/7869
http://hdl.handle.net/10669/12334
Summary: El estudio evalu? cuatro distintos protocolos de uso com?n en laboratorio y uno comercial, para la extracci?n de ADN a partir de material fijado en formalina y parafinado, correspondiente a cervix uterinos producto de conizaciones y LEEPs (loop electrocautery excision procedure), provenientes de los Servicios de Patolog?a de nueve Hospitales de la Caja Costarricense de Seguro Social (CCSS). Se encontr? que el protocolo m?s efectivo para obtener ADN viable para la PCR, es el basado en extracci?n fen?lica y que la calidad del ADN se ve profundamente afectada por el proceso de preservaci?n al que se ven sometidos los tejidos en los diferentes servicios. El promedio general de amplificaci?n estuvo por debajo del 50%. El rango de amplificaci?n por servicio va desde el 0%, hasta el 70%. Las razones por las que la PCR a partir de ADN aislado de parafinadas resulta inconsistente, se pueden resumir, a grosso modo, en: baja cantidad o ausencia de ADN blanco detectable, presencia de inhibidores, degradaci?n del ADN total blanco y fragmentaci?n de los ?cidos nucleicos debido a la fijaci?n en formalina.